免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
別 名 Autophagy related protein LC3 A; Autophagy related protein LC3 B; Autophagy related ubiquitin like modifier LC3 A; Autophagy related ubiquitin like modifier LC3 B; LC3; MAP1 light chain 3 like protein 1; MAP1 light chain 3 like protein 2; MAP1A/1B light chain 3 A; MAP1A/1B light chain 3 B; MAP1A/1BLC3; MAP1A/MAP1B LC3 A; MAP1A/MAP1B LC3 B; MAP1ALC3; MAP1BLC3; MAP1LC3A; MAP1LC3B; Microtubule associated protein 1 light chain 3 alpha; Microtubule associated protein 1 light chain 3 beta; Microtubule associated proteins 1A/1B light chain 3; Microtubule associated proteins 1A/1B light chain 3A; Microtubule associated proteins 1A/1B light chain 3B; MLP3A_HUMAN.
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
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產(chǎn)品名稱
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自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體0.2ml/200μg
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英文名稱
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Anti-LC3A/B
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貨號
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LZK63847
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英文名稱 Anti-LC3A/B
中文名稱 自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞骨架 細胞外基質(zhì)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human LC3A/B (31-121aa)
亞 型 IgG
抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術：
（一）原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
（二）準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
人絨毛間葉成纖維細胞裂解物 規(guī)格：200mg 英文名稱Human LBP ELISA Kit
人前脂肪細胞-內(nèi)臟裂解物 規(guī)格：100mg 英文名稱Human LPS ELISA Kit
人前脂肪細胞-皮下裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit
人間充質(zhì)干細胞-*裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit
人間充質(zhì)干細胞-脂肪裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human Lpa ELISA Kit
人間充質(zhì)干細胞-*裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human PCNA ELISA Kit
人臍帶間充質(zhì)干細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human apoB100 ELISA Kit
人肺間充質(zhì)干細胞裂解物 規(guī)格：0.15ml 英文名稱Human apoA1 ELISA Kit
人上皮細胞裂解物 規(guī)格：200mg 英文名稱Human Progesterone ELISA kit
人成纖維細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human inducible nitric oxide synthase ELISA KIT
人臍內(nèi)皮細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human Free-T4 ELISA Kit
人臍動脈內(nèi)皮細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱human f-E3 ELISA KIT
人臍平滑肌細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱human f-β-HCG ELISA KIT
人臍動脈平滑肌細胞裂解物 規(guī)格：20mg 英文名稱Human Inhibin B ELISA Kit
人腦微內(nèi)皮細胞cDNA 規(guī)格：20mg 英文名稱Human Inhibin A ELISA Kit
人抗型肝炎病毒核心IgM抗體HBcAbIgM定量檢測試劑盒 免疫測定
豬主要組織相容性復合體Ⅰ類MHCⅠ/SLAⅠ定量檢測試劑盒 免疫測定
豬活素AACVA定量檢測試劑盒 免疫測定
豬腸三葉子ITF定量檢測試劑盒 免疫測定
人抗型肝炎病毒核心抗體HBcAb定量檢測試劑盒 免疫測定
人S00鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白BS00A9定量檢測試劑盒 免疫測定
小鼠結(jié)蛋白（Desmin)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse Desmin ELISA Kit
小鼠組織相容性復合物（MHC)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse major histocompatibility complex ELISA Kit
自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體0.2ml/200μg小鼠上皮中性粒細胞活肽（ENA78)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒. Epithelial neutrophil activating peptide78 ELISA Kit
小鼠抗凝血酶（ATIII)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse ATIII ELISA Kit
小鼠神經(jīng)肽（NPY)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Rat neuropeptide Y ELISA Kit
小鼠生長激素釋放多肽（ghrelin)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse ghrelin ELISA Kit
小鼠Gelsolin Mouse Gelsolin ELISA Kit
