TGF-βR2試劑盒標本激活方法:

1. 將450ul 標本稀釋液加入到一支 1.5ml 進口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標本。

2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊，上下混勻。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。

3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊，上下混勻。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計算結果時乘 以稀釋倍數 50 。 （ 注意：不同的標本E2F1 的水平可能有較大差異，請根據實際情況靈活掌握稀釋度）

5. 細胞培養上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標本稀釋液＋ 50ul 樣本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。

檢測程序

1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活） 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3. 每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。

8. 每孔加入100ul 終止液混勻。

9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素)；AtT-20
小鼠小膠質細胞；BV2
小鼠骨髓瘤細胞；Fox-NY
小鼠胚胎成纖維細胞；MEF
小鼠淋巴瘤細胞(NK靶細胞)；YAC-1
野生型人c-kit受體細胞株；A7d
小鼠原B細胞株；BaF3
小鼠腦瘤細胞；BC3H1
小鼠成肌細胞；C2C12
小鼠肝癌細胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]
小鼠肥大細胞瘤細胞；P815
小鼠胚胎成纖維細胞；3T6-Swiss albino
小鼠胚胎成纖維細胞；C3H 10T1/2 2A6
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞；DCS
小鼠淋巴瘤細胞；EL4
小鼠前胃癌細胞；MFC
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞；RAW 264.7 [RAW264.7
小鼠胚胎成纖維細胞；3T3-L1
小鼠乳腺癌細胞；CCC-Ca761-03
小鼠胚胎成纖維細胞；BALB/C 3T3
小鼠淋巴細胞白血病；L1210
小鼠肺腺癌細胞系；LA795
C3H/An小鼠結締組織細胞（L929-TK-）；LTK-
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞；SH2
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞；SH3